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Ⅰ.随着基因工程的发展,人类利用羊细胞生物获得新的生物产量越来越广泛,近年来,研究人员发现莱茵衣藻在这方面也有不错的发展前景.莱茵衣藻是羊细胞真核绿藻,它是目前唯一能
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问题描述:

Ⅰ.随着基因工程的发展,人类利用羊细胞生物获得新的生物产量越来越广泛,近年来,研究人员发现莱茵衣藻在这方面也有不错的发展前景.莱茵衣藻是羊细胞真核绿藻,它是目前唯一能特异性地对细胞核、叶绿体和线粒体基因组进行遗传转化的真核生物.

(1)培养衣藻菌一定光照、从衣藻的代谢类型方面考虑,在其培养基中不需加入___营养成分,培养过程中还需要进行振荡,其目的是___.

(2)有研究者发现振荡培养会影响转化效率,他设计实验探究振荡时间与衣藻转化效率的关系,结果如图所示:

该研究结果可说明___.

(3)基因工程中用衣藻作为受体细胞的优势是___.衣藻转化的原理是___当转化的DNA分子通过___进入细胞核中时,乙随机和非同源方式整合到细胞核基因组的不同位点,该过程有___的参与.

Ⅱ.如表中列出了几种限制酶识别系列及其切割位点,请回答下列问题:

限制酶 EamHⅠ HtndⅢ EcoRⅠ SmaⅠ
识别序列及切割位点

(4)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有___个游离的磷酸基团.

(5)与只使用EcoR I相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止___.

(6)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在___的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测.

冯雄峰回答:
  (1)衣藻能进行光合作用合成有机物,因此培育衣藻的培养基中不需要加入碳源;培养过程中还需要进行振荡,其目的是让衣藻与二氧化碳、培养液充分混匀.   (2)曲线图说明:随着振荡时间的增加,衣藻转化效率先增加再降低,在3D时,转化效率最高.   (3)衣藻是单细胞生物,其繁殖快,且易培养,可作为基因工程的受体细胞.衣藻是真核生物,含有内质网和高尔基体,能对真核生物的蛋白质进行加工;当转化的DNA分子通过核孔进入细胞核中时,乙随机和非同源方式整合到细胞核基因组的不同位点,该过程有限制酶和DNA连接酶的参与.   (4)质粒是环状DNA分子,不含游离的磷酸基团;外源DNA分子的每一条链都含有一个游离的磷酸基团,因此共含有2个游离的磷酸基团.   (5)与只使用EcoR I相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止质粒和含有目的基因的外源DNA片段自身环化.   (6)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在以蔗糖为唯一碳源的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测.   故答案为:   (1)碳源   让衣藻与二氧化碳、培养液充分混匀   (2)随着振荡时间的增加,衣藻转化效率先增加再降低,在3D时,转化效率最高   (3)繁殖快、单细胞、易培养     可以对真核生物的蛋白质进行加工   核孔    限制酶和DNA连接酶   (4)0、2   (5)质粒和含有目的基因的外源DNA片段自身环化   (6)以蔗糖为唯一碳源
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